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- 產品名稱： FITC快速標記試劑盒
- 產品貨號： CSL0021K
- 貨期： 現(xiàn)貨
- 價格與訂購： 2800
- 數(shù)量：
庫存： 100
- 規(guī)格： 一盒
- 產品信息
- 如何訂購
產品介紹：
本FITC標記試劑盒提供了FITC快速標記所需全部試劑，用于含有伯氨基（NH2-）的蛋白/抗體/多肽或者其他大分子的標記,待標記物上的賴氨酸殘基的游離ε-氨基可與FITC 發(fā)生親核反應,形成硫脲連接而共價結合,形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好，其反應原理如下:
FITC清除指示劑為藍色，其為FITC的結構類似物，其數(shù)量為加入的FITC的20倍以上，在通過超濾管離心清除游離FITC的時候，如果超濾管中沒有藍色了，游離的FITC基本上被清除完畢。
| 試劑盒組份 | 不同規(guī)格組分含量 | ||
| 活性FITC | 2mg | 4mg | 6mg |
| 超 濾 管 | 1支 | ||
| 助溶劑(DMSO) | 1.5mL | 3mL | 4.5mL |
| 標記緩沖液 | 30mL | 60mL | 90mL |
| 清除指示劑 | 1mL | 2ml | 3ml |
| 標記物保存液 | 2mL | 4ml | 10ml |
產品特點：
l通過離心脫鹽和去除游離的FITC,無需透析或者凝膠過濾；
l本試劑盒配備指示劑，確保游離FITC去除完全;
l 使用方法簡單，無需額外準備試劑.
FITC標記使用量的計算：
每個反應中FITC試劑的使用量取決于待標記蛋白質氨基數(shù)目和總量。例如,通過我們實驗數(shù)據(jù)分析表明,標記2mg/ml 的抗體（IgG ，150KD）,每毫升抗體溶液（2mg/mL）加入100μL的FITC(2mg/mL) 能達到最佳標記效果效果;其他蛋白的標記可以根據(jù)實際情況,參照此比例類推。
實驗前準備：
1.仔細閱讀使用說明書。
2.提前20min 從冰箱中取出試劑盒，使試劑盒各組分平衡至室溫；
3.用FITC助溶劑（DMSO，使用前需要放在室溫融化）溶解FITC。
特別提示：
A.溶解的活好FITC最好一次性使用完，如果使用不完可以密封放在-20℃的冰箱內，一周內可以使用，但是標記效率會降低；
B.FITC助溶劑使用完之后需要立即密封保存，防止吸潮。
操作步驟：（本操作步驟按照 1mg抗體的量進行標記）
1.取1mg 待標記抗體于超濾管中，并加入不超過超濾管最大體積的標記緩沖液， 12,000 g 離心 10min；可以重復此步驟多次；最后一次超濾完成，可以加入適量標記緩沖液調整抗體的濃度到2mg/mL左右；
A.超濾管的最大體積和最大截留分子量，本實例超濾管的最大體積為 0.5mL；
B.如果待標記抗體濃度低時，可先超濾離心濃縮；
C.如果待標記物含有游離的氨基（Tris,氨基酸或者其他干擾物，需要用標記緩沖液反復超濾確保其去除干凈）。
2.加入溶解的FITC 50μL至上述超濾管中，并輕輕吹打混勻。放入37℃恒溫箱中避光溫育 60min以上；
3.標記結束以后加入 1/10體積的FITC清除指示劑至上述超濾管中；
4.12,000g 離心 10min；
5.加入適量標記緩沖液至上述超濾管中，并輕輕吹打混勻，12,000g 離心 10min。并重復操作多次，直至超濾管中沒有藍色，未標記的FITC被徹底清除干凈；收集超濾管中的溶液，即為FITC標記抗體。
標記偶聯(lián)比率的計算:
C是某個蛋白的一個常數(shù)；
MW是蛋白的分子量；
389是FITC的分子量；
195是偶聯(lián)的FITC在490nm（PH13.0）情況下1mg/ml的吸光值；
(0.35ⅹA495)是FITC在280nm情況下吸光值的校正系數(shù)；
E0.1%是1.0 mg/ml的蛋白在280nm的吸光值。
選購之前客戶需要根據(jù)待標記物的分子量大小和標記量選擇最適宜的型號
| 產品編號 | 最大標記體積 | 標記物最小分子量 | 可標抗體 |
| ARL0021K-3K-0.5mL | 0.5mL | 3kDa | 0.2-10mg |
| ARL0021K-3K-4.0mL | 4.0mL | 3kDa | 1.0-80mg |
| ARL0021K-3K-15mL | 15mL | 3kDa | 5-300mg |
| ARL0021K-10K-0.5mL | 0.5mL | 10kDa | 0.2-10mg |
| ARL0021K-10K-4.0mL | 4.0mL | 10kDa | 1.0-80mg |
| ARL0021K-10K-15mL | 15mL | 10kDa | 5-300mg |
| ARL0021K-30K-0.5mL | 0.5mL | 30kDa | 0.2-10mg |
| ARL0021K-30K-4.0mL | 4.0mL | 30kDa | 1.0-80mg |
| ARL0021K-30K-15mL | 15mL | 30kDa | 5-300mg |
| ARL0021K-50K-0.5mL | 0.5mL | 50kDa | 0.2-10mg |
| ARL0021K-50K-4.0mL | 4.0mL | 50kDa | 1.0-80mg |
| ARL0021K-50K-15mL | 15mL | 50kDa | 5-300mg |
| ARL0021K-100K-0.5mL | 0.5mL | 100kDa | 0.2-10mg |
| ARL0021K-100K-4.0mL | 4.0mL | 100kDa | 1.0-80mg |
| ARL0021K-100K-15mL | 15mL | 100kDa | 5-300mg |
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